ቪዲዮ: PCR በዲዲዮክሲ ዲኤንኤ ቅደም ተከተል እንዴት ይጫወታል?
2024 ደራሲ ደራሲ: Stanley Ellington | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-16 00:12
PCR እንዴት እንደሚጫወት ሀ በዲዲዮክሲ ዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል ውስጥ ያለው ሚና ? አጠቃቀም PCR ሊታወቁ የሚችሉ ደረጃዎችን ይፈቅዳል ዲ ኤን ኤ በጣም ዝቅተኛ የአብነት ደረጃዎች ውህደት ዲ ኤን ኤ . እንዴት ነው። በ ወቅት ዲዲዮክሲኑክሊዮታይድ መቀላቀል የዲኤንኤ ቅደም ተከተል እንደ "መባዛት የሚቋረጥ" ክስተት ተለይቷል?
በተጨማሪም ማወቅ ያለብን ለምንድን ነው PCR በዲኤንኤ ቅደም ተከተል ሂደት ውስጥ ለምን ጥቅም ላይ ይውላል?
PCR የሚወከለው የፖሊሜሬዝ ሰንሰለት ምላሽ , እና በአጭሩ, ይገለበጣል ዲ ኤን ኤ በሚሊዮን የሚቆጠሩ ጊዜያት በጣም በፍጥነት። ነው ጥቅም ላይ ውሏል ውስጥ የዲኤንኤ ቅደም ተከተል ምክንያቱም አንዳንድ ጊዜ ዲ ኤን ኤ ናሙና በጣም ትንሽ ነው. ይህ ለምሳሌ በወንጀል ትዕይንት ማስረጃ ወይም በጣም ያረጁ ናሙናዎች (ለምሳሌ ሙሚዎች) ይከሰታል።
በተመሳሳይ፣ ዲዲዮክሲስ ቅደም ተከተል ምንድን ነው? ዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል ትክክለኛው ውሳኔ ነው ቅደም ተከተል በዲ ኤን ኤ ናሙና ውስጥ የኑክሊዮታይድ. ይህንን ለማድረግ በጣም ታዋቂው ዘዴ ይባላል ዲዲዮክሲ ዘዴ ወይም የሳንገር ዘዴ (በፈጣሪው ስም የተሰየመው ፍሬድሪክ ሳንገር ለዚህ ስኬት የ1980 የኖቤል ሽልማት በኬሚስትሪ [ሁለተኛው] የተሸለመው) ነው።
ይህንን በተመለከተ ዲዲኦክሲኑክሊዮታይድ በዲኤንኤ ቅደም ተከተል ውስጥ ያለው ሚና ምንድን ነው?
Dideoxynucleotides ሰንሰለት የሚያራዝሙ አጋቾች ናቸው። ዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ, በ ውስጥ ጥቅም ላይ የዋለ Sanger ዘዴ ለ የዲኤንኤ ቅደም ተከተል . ዲዲዮኦክሲራይቦኑክሊዮታይድ 3' ሃይድሮክሳይል ቡድን ስለሌለው ከዚህ በኋላ ምንም ተጨማሪ ሰንሰለት ማራዘም አይቻልም። ዲዲዮክሲኑክሊዮታይድ በሰንሰለት ላይ ነው. ይህ ወደ መቋረጥ ሊያመራ ይችላል የዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል.
በዲኤንኤ ቅደም ተከተል ውስጥ የDdntp ተግባር ምንድነው?
ሀ. እንደ ፕሪመር ሆነው ይሠራሉ ዲ ኤን ኤ polymerase.
የሚመከር:
የመሪ ጊዜን ቅደም ተከተል እንዴት መቀነስ ይችላሉ?
የመሪ ጊዜዎን ይቀንሱ፡ ትዕዛዞችን በበለጠ ፍጥነት ለማስኬድ፣ የደንበኞችን እርካታ ለመጨመር እና የገንዘብ ፍሰትዎን ለማሻሻል 8 ስልቶች ታማኝ ያልሆኑ አቅራቢዎችን ከአቅርቦት ሰንሰለት ያስወግዱ። ወደ መጋዘንዎ ቅርብ የሆኑ ሻጮችን ይምረጡ። የፍላጎት ትንበያዎችዎን ከአቅራቢዎችዎ ጋር ያጋሩ። በቤት ውስጥ የውጭ ሂደቶችን አምጡ
ሳንገር ዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል እንዴት ይሠራል?
የሳንገር ቅደም ተከተል በ 3' መጨረሻ ላይ በዲዲዮክሲኑክሊዮታይድ የተቋረጠ የተለያየ ርዝመት ያላቸው የኤክስቴንሽን ምርቶች መፈጠርን ያስከትላል። ከዚያም የኤክስቴንሽን ምርቶች በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ወይም በ CE ይለያያሉ. ሞለኪውሎቹ በኤሌክትሪክ ፍሰት በጄል ፖሊመር በተሞላው ረዥም የመስታወት ካፒታል ውስጥ ይወጋሉ
በሳንገር ቅደም ተከተል እና በሚቀጥለው ትውልድ ቅደም ተከተል መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
የቀጣይ ትውልድ ቅደም ተከተል (NGS) ቴክኖሎጂዎች ተመሳሳይ ናቸው። በ Sangersequencing እና NGS መካከል ያለው ወሳኝ ልዩነት የድምጽ መጠን ቅደም ተከተል ነው። የሳንገር ዘዴ አንድ ነጠላ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጭን ብቻ በቅደም ተከተል ሲይዝ፣ኤንጂኤስ በጅምላ ትይዩ ነው፣በአንድ ጊዜ በሚሊዮን የሚቆጠሩ ፍርስራሾችን በቅደም ተከተል ያስቀምጣል።
ቅደም ተከተል ከመደረጉ በፊት የ PCR ምርቶችን ማጽዳት ለምን አስፈለገ?
የተፈለገውን ምርት ማረጋገጥ አስፈላጊ ነው, ይህም ልዩ ያልሆኑ ምርቶች እና የፕሪሚየር ዲመሮች እጥረት መኖሩን ማረጋገጥን ያካትታል. የምላሽ ድብልቅን ማጽዳት በተጨማሪም ያልተጣመሩ ፕሪመርሮችን እና ዲኤንቲፒዎችን ለማስወገድ አስፈላጊ ነው ይህም በሚቀጥሉት ምላሾች ውስጥ ጣልቃ መግባት እና ወደማይነበብ ቅደም ተከተል ሊመራ ይችላል
የ PCR ምርትን ቅደም ተከተል ማድረግ ይችላሉ?
የ PCR ምርቶች ቀጥተኛ ቅደም ተከተል. በመጀመሪያ ቁርጥራጮቹን ሳይዘጉ የ PCR ምርትን በቀጥታ ቅደም ተከተል ማድረግ በጣም ይቻላል. ከብዙ ወጥመዶች ውስጥ ወደ አንዱ እየገባህ እንዳልሆነ ለማረጋገጥ የተወሰነ ጊዜ ካላጠፋህ በቀር ቀጥተኛ PCR ቅደም ተከተል እምብዛም ስኬታማ አይሆንም።