ሳንገር ዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል እንዴት ይሠራል?

2024 ደራሲ ደራሲ: Stanley Ellington | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-16 00:12

Sanger ቅደም ተከተል በ 3 'መጨረሻ ላይ በዲዲዮክሲንዩክሊዮታይድ የተቋረጠ የተለያየ ርዝመት ያላቸው የኤክስቴንሽን ምርቶች መፈጠርን ያስከትላል። ከዚያም የኤክስቴንሽን ምርቶች በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ወይም በ CE ይለያያሉ. ሞለኪውሎቹ በኤሌክትሪክ ፍሰት በጄል ፖሊመር በተሞላው ረዥም የመስታወት ካፒታል ውስጥ ይወጋሉ።

በዚህ መንገድ የዲኤንኤ ቅደም ተከተል የሳንገር ዘዴ ምንድነው?

Sanger ቅደም ተከተል ፣ እንዲሁም ሰንሰለት መቋረጥ በመባልም ይታወቃል ዘዴ ፣ ቴክኒክ ነው የዲኤንኤ ቅደም ተከተል በሰንሰለት ማቋረጫ ዲዲዮክሲን ኑክሊዮታይድ (ዲዲኤንፒዎች) በተመረጠው ውህደት ላይ የተመሠረተ በ ዲ ኤን ኤ በብልቃጥ ወቅት ፖሊመሬሴ ዲ ኤን ኤ ማባዛት. የተገነባው በፍሬድሪክ ነው Sanger እና ባልደረቦች በ1977 ዓ.ም.

እንዲሁም የሰንሰለት ማብቂያ ቅደም ተከተል እንዴት ነው የሚሰራው? ሳንጀር ዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል ተብሎም ይታወቃል ሰንሰለት - መቋረጥ ዘዴ የ ቅደም ተከተል . ddNTPs ያስከትላሉ መቋረጥ የዲ ኤን ቲ ፒዎች በኒውክሊዮታይዶች መካከል ለፎስፈረስ ትስስር ምስረታ የሚያስፈልገውን የ 3'-OH ቡድን ስለሌላቸው የዲ ኤን ኤ ገመድ። ያለዚህ ትስስር ፣ እ.ኤ.አ. ሰንሰለት እየተፈጠሩ ያሉ ኑክሊዮታይዶች ናቸው። ተቋርጧል.

እንዲያው፣ ለምን የሳንገር ቅደም ተከተል እንሰራለን?

Sanger ቅደም ተከተል ነው ሀ ዘዴ የ የዲኤንኤ ቅደም ተከተል በሰንሰለት ማቋረጫ ዲዲዮክሲን ኑክሊዮታይድስ በምርጫ ውህደት ላይ የተመሠረተ በ ዲ ኤን ኤ በብልቃጥ ወቅት ፖሊመሬሴ ዲ ኤን ኤ ማባዛት. ከአጭር ንባብ ይልቅ አሁንም ጥቅም አለው። ቅደም ተከተል ቴክኖሎጂዎች (እንደ ኢሉሚና) ይችላል ማምረት የዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል > 500 ኑክሊዮታይድ ያነባል።

ሳንገር ቅደም ተከተል ትክክለኛ ነውን?

ሳንገር ቅደም ተከተል ከ 99.99% ጋር ትክክለኛነት ለክሊኒካዊ ምርምር "የወርቅ ደረጃ" ነው ቅደም ተከተል . ነገር ግን፣ አዳዲስ የኤንጂኤስ ቴክኖሎጂዎች በክሊኒካዊ የምርምር ላቦራቶሪዎች ውስጥም እየተለመደ መጥተዋል ምክንያቱም ባላቸው ከፍተኛ የውጤት አቅም እና በናሙና ዝቅተኛ ወጭ።