ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ በሚሠራበት ጊዜ እገዳ ኢንዛይሞች እንዴት ጥቅም ላይ ይውላሉ?

2024 ደራሲ ደራሲ: Stanley Ellington | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-16 00:12

1 መልስ። ዲ ኤን ኤ፣ አር ኤን ኤ ወይም ፕላዝማይድ በ ላይ ለመቁረጥ ገደብ ጣቢያዎች (እንደ EcoRI, BamHI, hindIII እና BglII ያሉ) ትናንሽ የጄኔቲክ ቁርጥራጮችን ለመፍጠር እና በዚህም ተለይተው ይታወቃሉ. ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ.

በተመሳሳይ ሁኔታ አንድ ሰው ሊጠይቅ ይችላል, የመገደብ ኢንዛይሞች ሚና የትኛው ነው?

ሀ ገደብ ኢንዛይም የተወሰነ ፣ አጭር የኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተልን የሚያውቅ እና ዲ ኤን ኤውን የሚቆርጠው በዚያ ልዩ ቦታ ላይ ብቻ ነው ፣ እሱም በመባል ይታወቃል። ገደብ የጣቢያ ወይም የዒላማ ቅደም ተከተል. በቀጥታ ባክቴሪያዎች ውስጥ; ገደብ ኢንዛይሞች ተግባር ህዋሱን ከቫይረስ ባክቴርያዎች ወራሪ ለመከላከል.

እንዲሁም የትኛውን ገደብ ኢንዛይም መጠቀም እንዳለቦት እንዴት ያውቃሉ? ክልከላ ኢንዛይሞችን በሚመርጡበት ጊዜ የሚከተሉትን ኢንዛይሞች መምረጥ ይፈልጋሉ፡ -

1. ማስገባቱን ወደ ጎን ያዙሩ ፣ ግን ያስገቡት ውስጥ አይቁረጡ።
2. በተቀባይዎ ፕላዝማይድ (ብዙውን ጊዜ በ Multiple Cloning Site (ኤምሲኤስ)) ውስጥ በሚፈለገው ቦታ ላይ ይገኛሉ፣ ነገር ግን በፕላዝሚድ ላይ ሌላ ቦታ አይቁረጡ።

ከዚህ ጎን ለጎን ክልከላ ኢንዛይሞች በምርምር ውስጥ እንዴት ጥቅም ላይ ይውላሉ?

በቤተ ሙከራ ውስጥ, እገዳ ኢንዛይሞች (ወይም ገደብ endonucleases ) ናቸው። ተጠቅሟል ዲ ኤን ኤ ወደ ትናንሽ ቁርጥራጮች ለመቁረጥ. ቁርጥራጮቹ ሁልጊዜ የሚከናወኑት በተወሰኑ ኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተሎች ነው. የተለየ እገዳ ኢንዛይሞች የተለያዩ የዲኤንኤ ቅደም ተከተሎችን ይወቁ እና ይቁረጡ.

የጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ሚና ምንድነው?

ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ የዲኤንኤ ቁርጥራጮችን እንደ መጠናቸው ለመለየት የሚያገለግል ዘዴ ነው። የዲኤንኤ ናሙናዎች በአንደኛው ጫፍ ላይ ወደ ጉድጓዶች (ኢንደንቴሽንስ) ተጭነዋል ጄል , እና እነሱን ለመጎተት የኤሌክትሪክ ጅረት ይተገበራል ጄል . የዲኤንኤ ቁርጥራጮች በአሉታዊ መልኩ ተሞልተዋል, ስለዚህ ወደ አወንታዊ ኤሌክትሮድ ይንቀሳቀሳሉ.