ጊብሰን ክሎኒንግ እንዴት ይሠራል?

2024 ደራሲ ደራሲ: Stanley Ellington | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-16 00:12

የ ጊብሰን ክሎኒንግ Master Mix በአንድ ቋት ውስጥ ሶስት የተለያዩ ኢንዛይሞችን ያቀፈ ነው። እያንዳንዱ ኢንዛይም ለምላሹ የተለየ እና ልዩ ተግባር አለው፡ T5 Exonuclease - ከዲኤንኤ 5' ጫፍ ወደ ኋላ በማኘክ ነጠላ-ክር ዲ ኤን ኤ 3' overhangs ይፈጥራል። ተጨማሪ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች በኋላ እርስ በርስ ሊጣበቁ ይችላሉ.

ይህንን ግምት ውስጥ በማስገባት ጊብሰን እንዴት ይሠራል?

የ ጊብሰን የ Assembly® ዘዴ ገደብ የኢንዛይም መፈጨትን ወይም ተኳሃኝ የሆኑ ገደቦችን ሳያስፈልግ ሁለት ወይም ከዚያ በላይ ቁርጥራጮችን ለመዝጋት የሚያስችል የክሎኒንግ ሂደት ነው። በምትኩ፣ በተጠቃሚ የተገለጹ ተደራራቢ ጫፎች በአጎራባች ፍርስራሾች ላይ እንከን የለሽ መቀላቀልን ለማስቻል በክፍሎቹ ውስጥ ይካተታሉ።

በተመሳሳይ፣ በጊብሰን መሰብሰቢያ ማስተር ድብልቅ ውስጥ ምን አለ? የ ጊብሰን ክሎኒንግ ማስተር ድብልቅ በአንድ ቋት ውስጥ ሶስት የተለያዩ ኢንዛይሞች አሉት። እያንዳንዱ ኢንዛይም ለምላሹ የተለየ እና ልዩ ተግባር አለው፡ T5 Exonuclease - ከዲኤንኤ 5' ጫፍ ወደ ኋላ በማኘክ ነጠላ-ክር ዲ ኤን ኤ 3' overhangs ይፈጥራል። ተጨማሪ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች በኋላ እርስ በርስ ሊጣበቁ ይችላሉ.

በዚህ መንገድ ወርቃማው በር ስብሰባ እንዴት ይሠራል?

ወርቃማው በር ክሎኒንግ ወይም ወርቃማው በር ስብሰባ ነው። ሞለኪውላር ክሎኒንግ ዘዴ አንድ ተመራማሪ ብዙ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮችን በአንድ ጊዜ እና በአቅጣጫ እንዲሰበስብ የሚያስችለው ዓይነት IIs ገደቦች ኢንዛይሞች እና T4 DNA ligase በመጠቀም ነው። ይህ ስብሰባ ነው። በብልቃጥ ውስጥ ተከናውኗል.

ጌትዌይ ክሎኒንግ እንዴት ነው የሚሰራው?

የ GATEWAY ክሎኒንግ ቴክኖሎጂ በፋጌ ኤል ዲኤንኤውን ለማዋሃድ በሚጠቀምበት ሳይት-ተኮር የማዋሃድ ስርዓት ላይ የተመሰረተ ነው። attB ጣቢያ በ ኢ.