DdNTPs የመጠቀም ዓላማ ምንድን ነው?

2024 ደራሲ ደራሲ: Stanley Ellington | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-16 00:12

ዲኤንቲፒ ማመሳከር Dideoxynucleotides ለዲኤንኤ ቅደም ተከተል የተለያየ ርዝመት ያላቸውን የዲ ኤን ኤ ክሮች ለማምረት በሳንገር ዲዲዮክሲ ዘዴ ጥቅም ላይ የሚውሉ triphosphates። ይህ የዲኤንኤ ፖሊሜራይዜሽን (ወይም የዲኤንኤ ማራዘሚያ) ሂደትን ያበቃል ምክንያቱም ይህ ሂደት ለመቀጠል 3'-OH ቡድን ያስፈልገዋል።

እሱ፣ ለምንድነው ddNTPs በቅደም ተከተል ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውሉት?

Dideoxynucleotides የዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴን ሰንሰለት የሚያራዝሙ መከላከያዎች ናቸው ፣ ጥቅም ላይ ውሏል ለዲኤንኤ በሳንገር ዘዴ ቅደም ተከተል . ዲዲዮኦክሲራይቦኑክሊዮታይድ 3' ሃይድሮክሳይል ቡድን የላቸውም፣ ስለዚህ ይህ ዲዲዮክሲኑክሊዮታይድ በሰንሰለቱ ላይ ከገባ በኋላ ምንም ተጨማሪ የሰንሰለት ማራዘም ሊከሰት አይችልም። ይህ ወደ ዲኤንኤው መቋረጥ ሊያመራ ይችላል ቅደም ተከተል.

በተመሳሳይ፣ ddNTPs ከዲኤንቲፒዎች ጋር ይያያዛሉ? አንድ ወይም ከዚያ በላይ ዲኤንቲፒዎች የማባዛት ምርቶችን ለማየት እንዲረዳ በራዲዮአክቲቭ ምልክት ተለጥፏል። በመጨረሻም, እያንዳንዱ ቱቦ ከተባሉት አራት ልዩ ኑክሊዮታይዶች ውስጥ አንዱን ያገኛል ዲዲዮክሲኑክሊዮታይድ ( ddNTPs ). ነገር ግን፣ አንዴ ከተቀላቀለ፣ ዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ ሰንሰለቱን የበለጠ ማራዘም አይችልም ምክንያቱም ከ3'-OH እስከ ያስፈልገዋል ማያያዝ ወደ ቀጣዩ ኑክሊዮታይድ.

በተመሳሳይ አንድ ሰው፣ ddNTPs ተከታታይ ምላሽን እንዴት ያቆማሉ?

በትንሽ መጠን ውስጥ ሲገኝ ተከታታይ ምላሾች ዲዲዮኦክሲራይቦኑክሊዮሳይድ ትራይፎፌትስ ( ddNTPs ) ማቋረጥ ቅደም ተከተል ምላሽ በማደግ ላይ ባሉ የዲ ኤን ኤ ክሮች ውስጥ በተለያየ አቀማመጥ. ddNTPs ተከታታይ ምላሽ ያቆማሉ ምክንያቱም እነሱ፡- የዲኤንኤ ፖሊመሬዜን ከአብነት ገመድ ላይ እንዲወድቅ ያደርጋሉ። ሐ.

Dideoxynucleotides የሚያካትተው ምን ዓይነት ዘዴ መጠቀም ይቻላል?

የሳንገር ቅደም ተከተል ሀ ዘዴ በሰንሰለት ማብቂያ ላይ በተመረጠው ውህደት ላይ የተመሰረተ የዲኤንኤ ቅደም ተከተል ዲዲዮክሲኑክሊዮታይድ በዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬሴ በብልቃጥ ዲ ኤን ኤ ማባዛት ወቅት. በ 1977 በፍሬድሪክ ሳንገር እና ባልደረቦች የተገነባው በጣም ሰፊ ነበር ጥቅም ላይ ውሏል ቅደም ተከተል ዘዴ ለ 40 ዓመታት ያህል.