PCR በግልባጭ ለምን ጥቅም ላይ ይውላል?

2024 ደራሲ ደራሲ: Stanley Ellington | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-16 00:12

RT - PCR ( የተገላቢጦሽ ግልባጭ PCR ) RT - PCR ነው። ጥቅም ላይ ውሏል በምርምር ላቦራቶሪዎች የጂን አገላለፅን ለማጥናት ለምሳሌ በሙከራዎች exons ከ intron ለመለየት እና ሊሆን ይችላል ጥቅም ላይ ውሏል ክሊኒካዊ የጄኔቲክ በሽታዎችን ለመመርመር እና የአደንዛዥ ዕፅ ሕክምናን ለመቆጣጠር.

ይህንን ከግምት ውስጥ በማስገባት ለግልባጭ ጽሑፍ ምን ያስፈልጋል?

ለመጀመር የተገላቢጦሽ ግልባጭ , የተገላቢጦሽ ትራንስክሪፕትሴስ አጭር ዲ ኤን ኤ oligonucleotide በአር ኤን ኤ አብነት ላይ ያለውን ተጨማሪ ቅደም ተከተሎች ለማያያዝ እና አዲስ ፈትል ለመዋሃድ እንደ መነሻ ሆኖ እንዲያገለግል ፕሪመር (primer) ይፈልጋል።

በተጨማሪም፣ cDNA ለ PCR መጠቀም ለምን አስፈለገ? ሲዲኤንኤ የራሱ አለው። አስፈላጊነት ውስጥ የፖሊሜሬዝ ሰንሰለት ምላሽ ( PCR ) ቴክኒክ። ሲዲኤንኤ በግልባጭ ትራንስክሪፕትሴስ በሚባሉ ኢንዛይሞች የተገለበጠ ውጤት ነው። አሁን፣ ትክክለኛው ቅጂ መሆን ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ፣ ይህ ሲዲኤንኤ ማገልገል ይችላል ዓላማ የአብነት ዲ ኤን ኤ ለ in vitro amplification እና ቀጣይ ትንታኔዎች.

በዚህ መንገድ፣ በእውነተኛ ጊዜ PCR እና በግልባጭ ግልባጭ PCR መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?

RT - PCR የዲኤንኤ ኮድ የተገላቢጦሽ ቅጂን ለማጉላት ጥቅም ላይ ይውላል; QPCR ማጉላትን ይለካል። 3. RT - PCR ለማጉላት ሲሆን qPCR ደግሞ ለመጠኑ ነው።

ሲዲኤንኤ በእጥፍ ተጣብቋል?

ከአር ኤን ኤ በተቃራኒ ፣ የዲ ኤን ኤ ሞለኪውሎች በቀላሉ ሊቆለፉ ይችላሉ (እነዚህ ‹ይባላሉ› ሲዲኤንኤ clones') በማድረግ cDNA ድርብ - የታሰረ እና ከቬክተር ዲ ኤን ኤ ጋር ተጣብቋል. የዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል ትንተና ከ አር ኤን ኤ በጣም ቀላል ነው ፣ ስለሆነም ፣ ሲዲኤንኤ በአር ኤን ኤ ፣ በተለይም በ eukaryotic mRNA ውስጥ አስፈላጊው ቅጽ ነው።